瞧一瞧:ATCC细胞库细胞复苏注意事项!
核心提示:ATCC细胞库细胞复苏注意事项
ATCC细胞库细胞复苏注意事项!
ATCC细胞库细胞复苏注意事项!
1、仔细浏览细胞说明拆迁补偿标准明细
书,了解细胞相干信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例,配置相应的完全培养基,确保细胞培养条件与说明书1致。若由于培养条件不1致而致使细胞出现问题,责任由客户自行承当。每株细胞2支冻存管复苏时建议先只复苏1支,若首次复苏出现问题请及时与我们获得联系。
2、取出冻存管,浸入37温水浴中,其实不时摇动令其尽快熔化,注意管口不要没入水面以下,以避免造成污染。
3、从37水浴中取出冻存管,用75%酒精擦拭冻存管表面,放入超净台内。吸出细胞悬液,转移至培养瓶内,补加6~8mL培养液,37温箱静置培养,隔天换新鲜培养液,以去除DMSO,或复苏当时离心去除DMSO,并在显微镜下视察细胞状态和密度;对贴壁展开较慢的细胞,建议复苏当时去除DMSO,待细胞贴壁展开后再换液。(原代细胞:细胞悬液离心后视察管底沉淀初步判断细胞量,后行台盼蓝染色以肯定细胞存活率;接种后隔天视察细胞贴壁量,以判定细胞贴壁率)
4、贴壁细胞:过夜培养后多数细胞会重新贴壁,待会合度80%左右时正常传代。若细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力。如台盼蓝染色证实细胞活力正常则1000rpm离心3~5min搜集细胞,用新鲜培养基重悬后移回培养瓶内重新贴壁培养;如台盼蓝染色证实细胞无活力,请在收到细胞24小时内联系我们,并反馈真实的细胞状态照片和台盼蓝染色照片,我们将尽快帮您解决。乡政府有强拆执法权吗
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5、悬浮细胞:过夜培养后多数细胞会逐步恢复活力,有光泽、饱满。若细胞光泽昏暗,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞无活力,请在收到细胞24小时内联系我们,并反馈真实的细胞状态照片和台盼蓝染色照片,我们将尽快帮您解决。
6、建议客户在收到细胞后每天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和中国微生物菌种查询网技术部沟通交换。
关键词:ATCC细胞库,细胞复苏,注意事项本文链接:/show⑵8483.html
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